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河南PCR实验室的防污染措施都有哪些？

发布者：中润官网发布时间：2021-07-28 16:00 阅读：

　　PCR实验室又叫基因扩增实验室。它能够通过DNA基因追踪系统来掌握患者体内的病毒含量。它最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是容易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。那么河南PCR实验室的防污染措施都有哪些呢？

　　1、PCR实验室主要污染源

　　（1）临床样本中存在的大量待测微生物。

　　（2）科研中得到的质粒克隆。

　　（3）以前分析研究的特定微生物。

　　（4）大量存在于实验环境中的特定微生物。

　　（5）以前扩增产物的残留污染。

　　这也是PCR实验室最容易产生的将造成假阳性的污染。PCR扩增可以引起实验室中扩增产物的积累，通常，一次典型的PCR扩增可以产生10^9拷贝的靶序列，如果气溶胶化，甚至最小的气溶胶都会含有10^6拷贝的扩增产物。如果不加以控制，在短期内累积的气溶胶化的扩增产物即会污染实验室中的试剂、仪器设备和通风系统，从而造成严重的实验室污染，出现大量的假阳性结果。一些RNA扩增技术如基于核酸序列的扩增（NASBA）、转录介导的扩增（TMA）和Qbeta复制酶等不易产生扩增产物的污染，这是由于它们的扩增产物为RNA，可以被环境中的RNA酶迅速地降解。

　　2、防污染措施

　　（1）严格分区实验室及严格遵守工作程序

　　基因扩增实验室分为试剂准备区、样本准备区、PCR扩增区、产物分析区等，必需备有各自必需的仪器设备、工作服、手套、加样器和通风系统。在每个区使用的试剂和废物，必需直接在其各自的区域内分装或包装。操作人员必需注意防止通过他们的头发、眼睛和衣服将扩增产物从污染区携带至清洁区的可能性。

　　（2）化学清污

　　实验台面可使用10%的次氯酸钠（漂白剂）清洗，然后再用70%乙醇或清水洗去次氯酸钠。次氯酸钠具有氧化损伤核酸的作用，从而使可能留在实验台面的扩增产物被破坏掉。要注意的是，次氯酸钠不能区分提取的DNA和PCR扩增产物，用次氯酸钠处理的样本不能用于核酸扩增检测。在实际工作中，有些物品比如放置扩增反应管的盘必需从污染区转回清洁区时，在转回之前，应将其置于2-10%的次氯酸钠溶液中过夜，并充分冲洗。

　　（3）扩增产物的修饰

　　临床PCR检测通常由3或4个步骤组成：核酸提取和扩增检测试剂的配制。使用商品试剂盒时，试剂的配制量可大大减少；样本的处理即靶核酸的提取；PCR扩增；扩增产物的分析。使用实时荧光PCR方法，PCR扩增和扩增产物的分析同时完成。

　　如对以前扩增产物进行适当修饰，应可以消除其污染后面新的扩增检测，但为保证不影响靶核酸的扩增检测，扩增产物修饰方法必需遵循两个基本原则：一是扩增产物修饰后，应可以与随后扩增的靶序列区分，这就要求区别性修饰在打开扩增反应管之前进行；二是修饰不能干扰正常的扩增检测。

　　扩增前修饰：UV照射、UNG酶处理。

　　扩增后修饰：补骨脂素、异补骨脂素、盐酸羟胺、引物水解法。

　　以上就是河南PCR实验室的一些防污染措施。更多实验室相关产品信息，敬请关注河南中润实验工程公司官网，产品咨询及实验室EPC设计建设请联系网站客服。

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